2014年執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》沖刺輔導精華(16)

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毛細管電泳法

　　毛細管電泳法(capillaryelectrophoresis，CE)系指以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)供試品中各組分的淌度(單位電場強度下的遷移速度)和(或)分配行為的差異而實現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。

　　在平板電泳技術(shù)中，使用高電場強度會使電泳介質(zhì)發(fā)熱，即產(chǎn)生焦耳熱。焦耳熱會引起電泳分離介質(zhì)的溫度梯度、黏度梯度以及速度梯度，從而引起區(qū)帶展寬、分離效能降低。在毛細管電泳法中，由于毛細管具有很高的表面積一體積比，有利于熱量從管壁擴散，可有效地克服焦耳熱的影響，因而具有很高的柱效。毛細管電泳儀的主要部件包括0～30kV可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流電源，內(nèi)徑小于1OOμm、長度一般為20～1OOcm的彈性石英毛細管，電泳池，檢測器和進樣裝置等。

　　毛細管電泳法主要有以下幾種分離模式：

　　1.毛細管區(qū)帶電泳

　　2.毛細管凝膠電泳

　　3.毛細管等速電泳

　　4.毛細管等電聚焦電泳

　　5.膠束電動毛細管色譜

　　6.毛細管電色譜

薄層色譜法的應用

　　(一)在鑒別試驗中的應用

　　1.與對照品比較RF值將同濃度的供試品溶液與對照品溶液，在同一塊薄層板上點樣、展開與檢視，供試品溶液所顯示主斑點的位置(RF)應與對照溶液的主斑點一致，而且兩主斑點的大小與顏色(或熒光)的深淺也應大致相同;或采用供試品溶液與對照品溶液等體積混合后，點樣、展開與檢視，應顯示單一、緊密的斑點。

　　2.與結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)比較RF值選用與供試品化學結(jié)構(gòu)相似的藥物對照品與供試品的T1C主斑點比較，兩者的RF應不同，或?qū)⑸鲜鰞煞N溶液等體積混合，應顯示兩個清晰分離的斑點。

　　(二)在雜質(zhì)檢查中的應用

　　1.雜質(zhì)對照法

　　2.自身稀釋對照法

　　3.其他方法除上述兩種方法外，也可將雜質(zhì)對照法與供試品溶液自身稀釋對照法并用。即特定雜質(zhì)限度采用雜質(zhì)對照品法，其他雜質(zhì)限度采用供試品溶液自身稀釋對照法控制。通常應規(guī)定雜質(zhì)的斑點數(shù)和單一雜質(zhì)量，當采用系列自身稀釋對照溶液時，也可規(guī)定估計的雜質(zhì)總量。

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